價(jià) 格：詢價(jià)
規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L
產(chǎn) 地：中國(guó)
貨 號(hào)：HQ200220001L
品 牌：匯研生物
為確保產(chǎn)品的性能和無(wú)憂的操作，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè)，有任何疑問(wèn)請(qǐng)咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員（聯(lián)系方式見附錄）。
1.產(chǎn)品介紹
Plasmid Focurose HPR純化原理是利用配基的嗜硫吸附，適用于分離純化閉環(huán)的超螺旋質(zhì)粒DNA。
特點(diǎn)：
a.快速、簡(jiǎn)單（一步純化）。
b.載量高、流速快、易于放大。
表1：介質(zhì)性能參數(shù)
基質(zhì) | 高剛性瓊脂糖 |
粒徑范圍 | 25-45um |
平均粒徑 | 35±5um |
結(jié)合載量1 | ≥2mg(pDNA)/ml(介質(zhì)) |
pH穩(wěn)定性 | 3-11(長(zhǎng)期) 2-13(短期) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 所有常用緩沖溶液中穩(wěn)定 30%異丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.5M NaOH |
流速 | ≥150cm/h |
操作壓力 | ≤0.5MPa |
貯存溶液 | 20%乙醇 |
貯存溫度 | 4-8℃ |
2.溶液制備
平衡液：2.1M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。
洗脫液：0.3M NaCl、1.7M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。
3.樣品制備
3.1樣品是經(jīng)過(guò)Focurose FF初步純化的收集組分。
3.2樣品過(guò)濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過(guò)濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過(guò)濾；平均粒徑>165μm，用 0.8μm過(guò)濾）。
4.純化流程（以XK16/10為例）
4.1采用液滴對(duì)液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。
4.2用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。
4.3用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
4.4將樣品以4ml/min的流速上樣。
4.5用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
4.6用洗脫液以2.5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
4.7用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。
4.8用保存液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
5.清洗（以XK16/10為例）
5.1用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
5.2用0.5M NaOH以1ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
5.3用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。
5.4用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
5.5用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
5.6用保存液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。
6.常見問(wèn)題
表2：常見問(wèn)題及解決方案
問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方案 |
純化時(shí)目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合 或結(jié)合量較低 | 1.上樣量過(guò)載 | 降低上樣量 |
2.上樣流速過(guò)快 | 降低上樣流速 | |
3.目標(biāo)物和介質(zhì)結(jié)合力弱 | 增加平衡液中(NH4)2SO4濃度 | |
洗脫時(shí)沒(méi)有收集到目標(biāo)物 或只收集到少量目標(biāo)物 | 1.目標(biāo)物沒(méi)有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少 | 先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合 |
2.洗脫時(shí)間不夠 | 降低流速，延長(zhǎng)洗脫液的保留時(shí)間 | |
3.洗脫體積過(guò)小 | 加大洗脫體積 | |
目標(biāo)物純度較低
| 1.樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)前處理 | 上柱前必須要經(jīng)過(guò)過(guò)濾 |
2.樣品粘度過(guò)高 | 用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?，降低樣品粘度和濃度?/span> | |
3.洗雜不徹底 | 加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致 | |
4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀 | 及時(shí)有效地清洗介質(zhì) | |
5.柱料裝填效果不佳 | 重新裝填或購(gòu)買 | |
6.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積 | 重新裝柱或降低儲(chǔ)樣體積 | |
7.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng) | 介質(zhì)使用完后，請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì) | |
介質(zhì)載量下降 | 1.上樣流速過(guò)快 | 降低上樣流速 |
2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集，導(dǎo)致載量下降 | 及時(shí)清洗介質(zhì) | |
3.使用次數(shù)過(guò)多，配基逐漸脫落 | 更換新介質(zhì) | |
色譜峰上升過(guò)陡 | 介質(zhì)裝填過(guò)緊 | 重新裝柱 |
色譜峰上升過(guò)緩或拖尾 | 介質(zhì)裝填太松 | 重新裝柱 |
柱床有裂縫或干涸 | 出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入 | 檢查管路是否有泄露或氣泡，重新裝柱 |
液流較慢 | 1.蛋白或脂類聚集 | 及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜 |
2.分離柱中微生物生長(zhǎng) | 所用試劑必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣； 樣品上柱前必須離心或過(guò)濾 |
7.訂購(gòu)信息
表3：訂購(gòu)信息表
產(chǎn)品 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Plasmid Focurose HPR | 25ml | HQ2002200025M |
Plasmid Focurose HPR | 100ml | HQ200220100M |
Plasmid Focurose HPR | 500ml | HQ200220500M |
Plasmid Focurose HPR | 1L | HQ200220001L |
Plasmid Focurose HPR | 5L | HQ200220005L |
Plasmid Focurose HPR | 20L | HQ200220020L |
備注：大規(guī)格包裝產(chǎn)品或其它產(chǎn)品購(gòu)買，請(qǐng)咨詢本公司當(dāng)?shù)劁N售或售前技術(shù)支持。
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