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SP Focurose HPR

價(jià) 格：詢價(jià)

規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地：中國

貨號(hào)：HL19801001L

品牌：匯研生物

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產(chǎn)品概述

為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作，使用前請仔細(xì)閱讀本手冊，有任何疑問請咨詢本公司技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員。

SP Focurose HPR是高耐壓的強(qiáng)陽離子交換介質(zhì)，適用于蛋白、多肽、核酸等所有帶電的生物分子的分離純化。中小顆粒設(shè)計(jì)，多應(yīng)用樣品的初期捕獲和中度純化。

預(yù)裝柱需聯(lián)合層析系統(tǒng)或蠕動(dòng)泵或注射器使用。

1 產(chǎn)品介紹

特點(diǎn)：

a.高耐壓。

b.兼顧流速性能和分辨率。。

c.高化學(xué)耐受性。

d.便于維護(hù)。

表1：SP Focurose HPR 性能參數(shù)

基質(zhì)	高剛性瓊脂糖
粒徑范圍	45-165μm
平均粒徑	75±5μm
介質(zhì)類型	強(qiáng)陽離子交換
帶電基團(tuán)	-SO3-
離子載量	0.10-0.14mmol H+/ml介質(zhì)
操作壓力	≤0.5MPa
流速	≥700cm/h
pH穩(wěn)定性	4-12（工作）/4-12（長期）/ 3-14（短期）
化學(xué)穩(wěn)定性	常用緩沖液、1.0M氫氧化鈉、8M 尿素、6M 鹽酸胍、70%乙醇
避免使用	氧化劑、陽離子型去污劑、陽離子型緩沖液
貯存溶液	0.2M NaAc，20%乙醇
貯存溫度	4-30℃

2 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖1：離子交換介質(zhì)的選擇

說明：

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí)，選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí)，選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2：陰離子交換緩沖液

pH范圍	緩沖鹽	濃度（mM）	平衡離子	pKa(25℃)
4.3-5.3	N-Methylpiperazine	20	Cl-	4.75
4.8-5.8	Piperazine	20	Cl-或HCOO-	5.33
5.5-6.5	L-Histidine	20	Cl-	6.04
6.0-7.0	bis-Tris	20	Cl-	6.48
6.2-7.2	bis-Tris propane	20	Cl-	6.65
7.3-8.3	Triethanolamine	20	Cl-或CH3COO-	7.76
7.6-8.6	Tris	20	Cl-	8.07
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	20	SO42-	8.52
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	50	Cl-或CH3COO-	8.52
8.4-9.4	Diethanolamine	50	Cl-	8.88
8.4-9.4	Propane 1,3-Diamino	20	Cl-	8.88
8.6-9.6	bis-Tris propane	20	Cl-	9.10
9.0-10.0	Ethanolamine	20	Cl-	9.50
9.2-10.2	Piperazine	20	Cl-	9.73
10.0-11.0	Propane 1,3-Diamino	20	Cl-	10.55
10.6-11.6	Piperidine	20	Cl-	11.12

表3：陽離子交換緩沖液

pH范圍	緩沖鹽	濃度（mM）	平衡離子	pKa(25℃)
1.4-2.4	Maleic acid	20	Na+	1.92
2.6-3.6	Methyl malonic acid	20	Na+或Li+	3.07
2.6-3.6	Citric acid	20	Na+	3.13
3.3-4.3	Lactic acid	50	Na+	3.86
3.3-4.3	Formic acid	50	Na+或Li+	3.75
3.7-4.7	Succinic acid	50	Na+	4.21
4.3-5.3	Acetic acid	50	Na+或Li+	4.75
5.1-6.1	Succinic acid	50	Na+	5.64
5.2-6.2	Methyl malonic acid	50	Na+或Li+	5.76
5.6-6.6	MES	50	Na+或Li+	6.27
6.7-7.7	Phosphate	50	Na+	7.20
7.0-8.0	HEPES	50	Na+或Li+	7.56
7.8-8.8	BICINE	50	Na+	8.33

說明：

a.按照表3和表4選擇緩沖溶液的種類和濃度。

b.錯(cuò)誤的緩沖液（種類和濃度）會(huì)干擾分離效果(如分離度、載量、pH波動(dòng)等)。

c.所使用緩沖液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍內(nèi)。

d.使用分析純或者更高純度的緩沖液。

e.在溶液配制后，須經(jīng)過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用0.8μm過濾）和脫氣處理（超聲或負(fù)壓）。

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致，可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用 0.8μm過濾）。

4 純化流程（以XK16/10為例）

采用液滴對(duì)液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV（CV指柱床體積，下同）。

用洗脫液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

將樣品以5ml/min的流速上樣。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

用洗脫液以5ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

備注：再生液=平衡液+1M NaCl，其它組分不變。

5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注：若實(shí)際情況和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)有偏差，可以維持停留時(shí)間不變。

6 維護(hù)

6.1平衡

柱子裝填完成后，用平衡液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后，用再生液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì)，例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強(qiáng)離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強(qiáng)疏水蛋白。

用1.0M NaOH，30%異丙醇以30cm/h的流速反向沖洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進(jìn)行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在0.2M NaAc 、20%乙醇中4-30℃保存。

7 訂購信息

表4：訂購信息表

產(chǎn)品	規(guī)格	貨號(hào)
SP Focurose HPR	25ml	HL19801025M
SP Focurose HPR	100ml	HL19801100M
SP Focurose HPR	500ml	HL19801500M
SP Focurose HPR	1L	HL198011001L
SP Focurose HPR	5L	HL198011005L
SP Focurose HPR	20L	HL19801020L